免疫組化服務的操作步驟介紹

發布日期： 2022-11-15

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　　近年來，隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現，使許多疑難得到了明確診斷。在常規病理診斷中，5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態學診斷。尤其是免疫組化在診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可，其在低分化或未分化的鑒別診斷時，準確率可達50%-75%。

　　免疫組化操作步驟

　　⑴、石蠟切片脫蠟至水。

　　⑵、3%H2O2室溫孵育5-10分鐘，以消除內源性過氧化物酶的活性。

　　⑶、蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘x2（如需抗原修復，可在此步后進行）。

　　⑷、5-10%正常山羊血清（PBS稀釋）封閉，室溫孵育10分鐘，傾去血清，勿洗。滴加一抗工作液，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。

　　⑸、PBS沖洗，5分鐘x3次。

　　⑹、滴加適量生物素標記二抗工作液，37℃孵育10-30分鐘。

　　⑺、PBS沖洗，5分鐘x3次。

　　⑻、滴加適量的辣根酶或堿性磷酸酶標記的鏈霉卵白素工作液，37℃孵育10-30分鐘。

　　⑼、PBS沖洗，5分鐘x3次。

　　⑽、顯色劑顯色3-15分鐘（DAB或NBT/BCIP）

　　⑾、自來水充分沖洗，復染，脫水，透明，封片。

　　從免疫組化結果而言，免疫組化技術服務主要涉及抗體免疫組化結果的描述與分析，圖片的確定與選取，相關數據的提供，上述工作是免疫組化工作的重點內容，只有嚴格的免疫組化設計，標準的免疫組化操作，專業化的結果分析才能更好的滿足客戶的要求，這點對于形式為腹水，上清，培養液之類的抗體顯得更為重要。